浙江農(nóng)林大學(xué)林木遺傳育種學(xué)、森林培育、野生動(dòng)植物保護(hù)與利用專業(yè)碩士研究生入學(xué)考試

    植物細(xì)胞與基因工程考試大綱

    本《植物細(xì)胞與基因工程》考試大綱適用于浙江農(nóng)林大學(xué)林木遺傳育種學(xué)、遺傳學(xué)碩士學(xué)位的研究生入學(xué)考試。主要內(nèi)容包括植物基因工程和植物細(xì)胞工程兩大部分，要求考生能夠了解植物細(xì)胞與基因工程各研究領(lǐng)域中常用的技術(shù)手段，包括植物細(xì)胞與組織培養(yǎng)技術(shù)、細(xì)胞融合技術(shù)、基因工程的基本操作技術(shù)、PCR技術(shù)以及植物細(xì)胞與基因工程相結(jié)合的以基因轉(zhuǎn)移技術(shù)為核心的植物基因轉(zhuǎn)移技術(shù)等相關(guān)知識(shí)，并具有綜合運(yùn)用所學(xué)知識(shí)分析問題和解決問題的能力。試卷滿分為100分，考試時(shí)間為120分鐘。

    考試內(nèi)容

    第一章緒論部分

    基本要求：要求學(xué)生大體了解基因工程的發(fā)展史、基因工程的研究內(nèi)容和基因工程的應(yīng)用范圍。

    第一節(jié)：基因研究的發(fā)展歷史，基因工程的誕生

    簡(jiǎn)要介紹基因研究發(fā)展理論上的三個(gè)重要發(fā)現(xiàn)，技術(shù)上的三個(gè)重要成果

    第二節(jié)：研究內(nèi)容：

    基因工程的概念，以及基因工程的研究內(nèi)容。

    第三節(jié)：基因工程的應(yīng)用

    基因工程已在醫(yī)藥業(yè)、農(nóng)牧業(yè)、食品工業(yè)、環(huán)境保護(hù)、能源開發(fā)領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用，本節(jié)著重介紹基因工程在這些方面的應(yīng)用。

    重點(diǎn)：基因工程的研究內(nèi)容，以及基因工程的應(yīng)用

    難點(diǎn)：基因工程的研究內(nèi)容，以及基因工程的應(yīng)用

    第二章：基因工程的基本操作程序

    基本要求：要求學(xué)生掌握基因工程的五個(gè)方面基本操作程序，對(duì)基因工程有初步了解。

    第一節(jié)：帶有目的基因的DNA片段的制備

    介紹來自真核生物和原核生物的目的基因的DNA片段制備的方法（ｃDNA法，限制酶法，PCR方法，物理法以及人工合成法等）以及植物目的基因克隆的新策略。

    第二節(jié)：DNA片段與載體DNA體外重組

    使用某種方法將DNA分子進(jìn)行剪切，然后進(jìn)行兩種DNA分子的連接。

    第三節(jié)：DNA重組體轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞

    利用化學(xué)法或電擊法將重組體導(dǎo)入大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞中。

    第四節(jié)：重組體克隆的篩選與鑒定

    重組體克隆的篩選與鑒定的方法較多，本節(jié)只介紹兩種常用的方法（表型直接篩選法和菌落或噬菌斑原位雜交。

    第五節(jié)：外源基因的表達(dá)

    外源基因的表達(dá)是基因操作過程的重要組成部分。成功的表達(dá)是基因工程操作的目的，外源基因在表達(dá)體系中，既能保持原來的生物活性又能高效地產(chǎn)生蛋白產(chǎn)物。

    重點(diǎn)：基因工程的基本操作程序

    難點(diǎn)：帶有目的基因的DNA片段的克隆以及外源基因的表達(dá)。

    第三章基因工程的工具酶

    基本要求：要求學(xué)生了解基因工程中工具酶的特點(diǎn)特性、以及應(yīng)用

    第一節(jié)：基因工程工具酶的概念

    第二節(jié)：基因工程工具酶的分類，性質(zhì)

    根據(jù)工具酶的功能將工具酶分為三種不同的類型，剪切酶，修飾酶和連接酶，分別介紹其性質(zhì)。

    第三節(jié)：限制性核酸內(nèi)切酶的性質(zhì)及其應(yīng)用

    限制性核酸內(nèi)切酶在基因工程的操作中使用的較多，所以該節(jié)重點(diǎn)介紹其性質(zhì)及其應(yīng)用。

    第四節(jié)修飾酶

    聚合酶、堿性磷酸酶和甲基化酶

    第五節(jié)連接酶

    連接酶的種類、連接酶的反應(yīng)條件、連接酶的影響因素

    重點(diǎn)：基因工程工具酶的限制性內(nèi)切酶II的特點(diǎn)和應(yīng)用，修飾酶和連接酶的特點(diǎn)和應(yīng)用

    難點(diǎn)：基因工程工具酶的性質(zhì)和在基因工程中的應(yīng)用

    第四章基因工程載體

    基本要求：要求學(xué)生了解和掌握基因工程載體的要求，特性，以及如何選擇基因工程的載體。

    第一節(jié)：基因工程載體的概念及其分類，

    簡(jiǎn)要介紹基因工程所用載體的概念，以及分類情況，如質(zhì)粒載體、噬菌體載體等。

    第二節(jié)：各種不同的基因工程載體的特性及其應(yīng)用

    針對(duì)不同的基因工程載體進(jìn)行分別講解，將載體的特性，及其在基因工程中的應(yīng)用一一介紹。

    重點(diǎn)：基因各種不同的基因工程載體的特性

    難點(diǎn)：如何選擇基因工程的載體

    第五章聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)

    基本要求：要求學(xué)生了解和掌握PCR相關(guān)技術(shù)以及應(yīng)用。

    第一節(jié)：PCR的原理

    第二節(jié)：PCR的種類

    根據(jù)不同的目的，對(duì)PCR進(jìn)行分類，

    第三節(jié)：應(yīng)用PCR時(shí)的注意事項(xiàng)

    第四節(jié)：PCR在各個(gè)領(lǐng)域的應(yīng)用

    現(xiàn)你分子生物學(xué)發(fā)展很快，PCR的應(yīng)用范圍很廣泛，如醫(yī)學(xué)界、法醫(yī)、農(nóng)作物的應(yīng)用以及植物的育種方面等。

    重點(diǎn)：PCR的原理和種類

    難點(diǎn)：PCR應(yīng)用時(shí)應(yīng)注意的事項(xiàng)以及如何應(yīng)用PCR

    第六章分子標(biāo)記技術(shù)

    基本要求：要求學(xué)生掌握分子標(biāo)記技術(shù)的相關(guān)原理和應(yīng)用

    第一節(jié)：分子標(biāo)記的基本原理

    第二節(jié)：分子標(biāo)記的類型

    第三節(jié)：新型分子標(biāo)記的開發(fā)和應(yīng)用

    第四節(jié)：分子標(biāo)記的應(yīng)用

    重點(diǎn)：分子標(biāo)記的開發(fā)和應(yīng)用

    難點(diǎn)：選擇分子標(biāo)記應(yīng)注意的事項(xiàng)

    第七章植物基因工程

    基本要求：要求學(xué)生了解和掌握植物基因轉(zhuǎn)化的方法以及植物基因工程的應(yīng)用和發(fā)展

    第一節(jié)根瘤農(nóng)桿菌及其轉(zhuǎn)化體系

    系統(tǒng)介紹根瘤農(nóng)桿菌及其轉(zhuǎn)化體系。

    第二節(jié)　基因的導(dǎo)入方法

    介紹基因轉(zhuǎn)化的各種不同的方法如基因槍轉(zhuǎn)化，農(nóng)桿菌介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)化，

    第三節(jié)　轉(zhuǎn)基因植物的鑒定

    表型鑒定，分子鑒定和蛋白質(zhì)鑒定。

    第四節(jié)　植物基因工程的應(yīng)用與展望

    重點(diǎn)：植物基因?qū)氲姆椒ê娃D(zhuǎn)基因植物的鑒定方法

    難點(diǎn)：根癌農(nóng)桿菌及其轉(zhuǎn)化體系的特點(diǎn)和性質(zhì)

    第八章細(xì)胞融合技術(shù)

    基本要求：了解細(xì)胞融合的基本原理和融合材料的制備，細(xì)胞融合技術(shù)，單克隆抗體的生產(chǎn)以及新物種的培育。

    第一節(jié)細(xì)胞融合的基本原理和融合材料的制備。

    第二節(jié)細(xì)胞融合技術(shù)及影響因素。

    第三節(jié)融合細(xì)胞的選擇。

    第四節(jié)單克隆抗體的生產(chǎn)以及新物種的培育。

    第五節(jié)細(xì)胞融合技術(shù)的進(jìn)展與展望。

    重點(diǎn)：細(xì)胞融合技術(shù)，單克隆抗體的生產(chǎn)以及新物種的培育。

    難點(diǎn)：細(xì)胞融合技術(shù)的進(jìn)展與展望。

    第九章植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)

    基本要求：了解植物組織與細(xì)胞培養(yǎng)的區(qū)別與發(fā)展歷程；植物細(xì)胞培養(yǎng)，包括方法、應(yīng)用、生物反應(yīng)器培養(yǎng)、固定化培養(yǎng)以及存在的問題等，并從列舉的植物中了解植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)在實(shí)際的應(yīng)用。

    第一節(jié)簡(jiǎn)介植物組織與細(xì)胞培養(yǎng)的區(qū)別與發(fā)展歷程。

    第二節(jié)植物細(xì)胞培養(yǎng)，包括方法、應(yīng)用、生物反應(yīng)器培養(yǎng)、固定化培養(yǎng)以及存在的問題等

    第三節(jié)植物單細(xì)胞培養(yǎng)，包括單細(xì)胞的制備、單細(xì)胞培養(yǎng)方法、植物細(xì)胞大規(guī)模懸浮培養(yǎng)、。

    第四節(jié)應(yīng)用舉例，列舉商品化的細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)的植物的研究

    重點(diǎn)：植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，包括方法、應(yīng)用、生物反應(yīng)器培養(yǎng)、固定化培養(yǎng)以及存在的問題等。包括原生質(zhì)體的制備、培養(yǎng)、發(fā)育和植株再生等。

    難點(diǎn)：植物單細(xì)胞制備、培養(yǎng)、發(fā)育和植株再生等。

    參考書（書名，編著者，出版社，出版時(shí)間,自編教材需有文字材料）

    《基因工程原理與應(yīng)用》陳宏主編中國農(nóng)業(yè)出版社2004

    《植物細(xì)胞工程原理與技術(shù)》周維燕主編，中國農(nóng)業(yè)出版社，

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